小鼠防御素α1(DEFα1) elisa試劑盒操作步驟：

1） 將標(biāo)準(zhǔn)品工作液依此加入到前兩列孔中，每個濃度的工作液并列加兩孔，每孔100ul.待測樣品加入到其他孔，每孔100ul（若樣本濃度高于檢測范圍，需要用標(biāo)準(zhǔn)品&樣本稀釋液稀釋后取樣）。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育90分鐘。

2） 棄去液體，甩干，不用洗滌。每個孔中立即應(yīng)加入生物素化抗體/抗原工作液100ul，混勻，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃孵育1小時。

3） 甩盡孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液350ul，浸泡1-2分鐘，吸取或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，再厚的吸水紙上拍干。如此重復(fù)洗板步驟3次。

4） 棄去孔內(nèi)液體，洗板5次，方法步驟同3。

5） 每孔加底物溶液（TMB）90ul，混勻，加上覆膜，37℃避光孵育15分鐘左右。

6） 每孔加終止液50ul，終止反應(yīng)。

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