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IP質(zhì)譜分析定義

IP（Immunoprecipitation，IP）即免疫沉淀，是一種基于免疫學原理和傳統(tǒng)親和純化方法開發(fā)的用來檢測、分離、純化蛋白質(zhì)的方法。將IP獲得的蛋白質(zhì)通過質(zhì)譜分析鑒定，即IP質(zhì)譜分析，IP質(zhì)譜分析已廣泛用于蛋白種類、含量、表達量變化及蛋白相互作用研究。

IP質(zhì)譜分析原理

IP質(zhì)譜分析，通過免疫沉淀法獲得目的蛋白（抗原），再對目的蛋白進行后續(xù)質(zhì)譜分析。免疫沉淀法，通過在含有目的蛋白的混合體系中加入與其特異性結合的抗體蛋白形成蛋白復合物，再通過洗脫或離心沉淀將目的蛋白分離出來，zuì后通過高效液相質(zhì)譜分析來實現(xiàn)預期的實驗目的。

目的蛋白的濃度和抗體與抗原之間的親和力是免疫沉淀技術的關鍵，過低的目的蛋白濃度和抗體、抗原親和力都會導致抗體與抗原結合不完全或不成功，故混合體系的制備和抗體的選擇至關重要。

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